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组织培养播种交配效率高,不不受季节和灾害性气候的影响,可周年交配,且材料能以几何级数细胞分裂,繁苗速度快。培育技术简单易行,管理便利,培育条件可人为掌控,有利于自动化管理,构建工厂化生产。无…组织培养播种交配效率高,不不受季节和灾害性气候的影响,可周年交配,且材料能以几何级数细胞分裂,繁苗速度快。
培育技术简单易行,管理便利,培育条件可人为掌控,有利于自动化管理,构建工厂化生产。无性繁殖的方式可维持母体的优良性状,均匀分布完全一致,苗木质量好。在某些植物上还能解决问题无法用种子交配的较慢交配问题等。
1、材料的自由选择和处置自由选择优良的核桃品种,生长强壮、污染较较少的母株作为外植体的来源。一般大田的材料汚疮较多,不更容易取得无菌系由,可将其栽培在温室内,以增加污染。
少量材料也能用水培的方式取得嫩枝。展开培育时剪取当年生子的嫩枝,剪去复叶,剪3~4厘米的带上腋芽茎段。再行用自来水流水冲洗1~3小时,在无菌条件下用75%酒精消毒30~50秒,再行用0.01%升汞洗净3~8分钟,最后用无菌水冲洗3~5次,以待疫苗。
2、培育步骤(1)茎钝(段)培育最常用的茎段培养基是DKW培养基。将消毒的茎段截去两端1毫米的端面,植人培养基中。培育条件是温度25℃,光照强度l000~3000勒克斯,光周期14~16小时光照,8~10小时黑暗。
(2)继代扩繁是茎段培育的主要一步。一种方法是增进腋芽的较慢生长,一种是诱导构成大量长短芽。通过腋芽细胞分裂的方法可以维持品种的优良特性,再次发生变异的几率较小,细胞分裂速度快,理论上一年内1个芽可细胞分裂10万株以上。诱导长短芽会产生较小几率的变异。
细胞分裂后构成的丛生苗或単芽苗拆分后,移往到新的培养基中继代培育,4~8周继代一次。一个芽苗可细胞分裂5~25个小苗,并展开多次继代培育,符合生产市场需求。(3)生根培育继代扩繁的芽苗没根,一般必须在生根培养基中诱导生根。
生根时所用的基本培育用MS培养基,但须要减少无机盐浓度,一般用1/2或1/4的量,并增加或除去细胞分裂素,减少生长素的浓度。在生根阶段相结合黑暗条件,则生根效果更佳。还有一种用芽苗采收的方法来生根的。
先将芽苗在生长素中较慢洗藤或在所含比较低液度生长素的培养基中培育5~10天,然后栽入温室中的培育基质(珍珠岩:蛙石=2:1)中,常常喷雾,几天后可自行生根。由于核桃组培苗生根的问题仍然没获得很好的解决问题,因此只需获取没生根的相接穂,展开芽苗选育,不展开生根培育。3、炼苗及修剪重制是一个由异养改变为自理的过程。
试管苗修剪是组织培养过程的重要环节,也是最费工的一个环节,这个工作环节做到很差,就不会使组培播种前功尽弃。(1)修剪用基质和容器常用的修剪基质有珍珠岩、蛭石、沙子等,可使用単一基质或填充基质。
修剪组培苗的容器常与6厘米x6厘米的塑料钵,也可用于播种盘。(2)修剪前的炼苗试管苗修剪前要再行将培育容器不开口在大自然光照下磨练2~3天,让试管苗拒绝接受强光太阳光,再行开口炼苗1~2天,遭受低温磨练,以逐步适应环境外界环境条件。
(3)修剪和幼苗的管理试管苗修剪时,不应首先浸去根部吸附的培养基,防止微生物的交配污染,导致小苗丧生。修剪后要维持较高的湿度,并展开遮阳。以后逐步减少湿度、减少光照,以后与外界环境完全相同。
经过温室修剪圈养的小苗培育一段时间,宽出有根和新的叶片后可修剪到大田。
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